De afgelopen drie weken heb ik aan het einde van de week steeds twee dagen meegedaan met het lab practicum van de 3e jaars tandheelkunde studenten bij de afdeling Orale Microbiologie.
Dit practicum begon met een inleidend college over de microflora in de mond en over wat de associatie is tussen een hoeveelheid van bepaalde micro- organismen in de mond en het risico op aandoeningen zoals cariës en parodontitis en over de kans van slagen van een endodontisch behandeld wortelkanaal.
Het prakticum dat hierop volgde had veel overeenkomsten met het microbiologie practicum dat ik in het 1e jaar volgde tijdens het blok “Mens & Ziekte 1”.
Tijdens het practicum heb ik de volgende proefjes gedaan:
- Het kweken van de bacteriën van monsters uit een geprepareerd wortelkanaal en uit het operatiegebied (klinische kroon en cofferdam) om zodoende te kunnen beoordelen of het operatiegebied en het kanaal steriel zijn. De hieruit volgende positieve kweken hebben we op bloedagar platen en MS platen (streptokokken), entrokokken specifieke platen en rogosa platen (lactobacillen) getransplanteerd en gekweekt. Hierbij vonden we in onze aerobe kweken veel bacteriesoorten en in onze anaerobe kweek van het wortelkanaal een fusobacterie.
- Het kweken van bacteriën uit diepe pockets van een parodontitis patiënt met als reden te kijken welke mogelijke paropathogenen in de pockets aanwezig zijn.
Mijn patiënt had een relatief gezonde mondflora. Om deze reden kregen we een kweek uit de ochtendgroep om te beoordelen. Deze meneer had 7*10^7 / mL bacteriën waarvan 90% de Porphyromonas Gingivalis was. Dit betrof dus een ernstig zieke mondflora. - Het kweken van samples van zieke patiënten met pathologie in de mond, om te kijken of zij inderdaad een schimmelinfectie dan wel een bacteriële infectie hadden. Mijn patiënte had tuberculose met een ernstige infectie met de pseudomonas bacterie (voor de liefhebbers ook te vinden op camembert kaas) en gist.
- Het testen van het sterilliserend vermogen van een vacuum autoclaaf vergeleken met een non vacuum autoclaaf. Hierbij steriliseerden we gesloten tray’s en petrischalen waarbij we een spore vormende bacterie, de Bacillus Stearothermophilius, gebruikten om dit te testen. Na het kweken van de samples hadden we groei bij het autoclaveren zonder vacuüm.
- Het desinfecteren van het operatiegebied bij een wortelkanaalbehandeling met waterstofperoxide 35%, gevolgd door Jood 5% waarna het jood door thiosulfaat geïnactiveerd werd en van de oppervlakken een kweek gemaakt werd. Het bleek dat de oppervlakken bestreken met de Bacillus Subtilis geen groei vertoonden bij deze desinfectie routine.
- Het kweken van bacteriën in combinatie met 7 verschillende soorten antibiotica om resistentie en effectiviteit van de te kiezen behandeling te beoordelen. In onze kweek met de Fusobacterium Nucleatum bleek deze alleen resistent voor Erythromicine.
- Het kweken van eigen speeksel en plaque om de aanwezigheid van verschillende soorten bacteriën en schimmels te beoordelen. Ook werd de eigen plaque van de marginale gingiva en het posteriore deel van de tong onder de microscoop na gram kleuring beoordeeld op samenstelling.
Uit de kweken bleek dat ik in mijn speeksel en plaque zo goed als geen Streptococcus Mutans, Lactobacillen, Staphylococcus Aureus en Candida heb zitten; mijn mondflora lijkt op die van een gezond individu.
Department of Oral Mircobiology - Laboratory practicals
For the past three weeks I participated the last two days of the week in the lab practical’s of the third year dental students at the Department of Oral Microbiology.
This practicum started with an introductory lecture on the micro flora in the mouth and on what the association is between a number of specific micro-organisms in the mouth and on the risk of diseases such as caries and periodontitis and on the likelihood of success of an endodontically treated root canal.
The practicum that followed was very similar to the microbiology laboratory practicum that I had in the first year of my education during the block “Mankind & Disease 1”.
During the practicum, I did the following experiments:
- Growing the bacteria from samples from a prepared root canal and of the area of the operation (clinical crown and rubber dam) in order to assess whether the operation area and the canal were sterile or not. The resulting positive cultures we have transplanted and cultivated on blood agar plates and MS plates (Streptococcus), rogosa (Lactobacilli) and Enterococcus specific plates. Here we found many species in our aerobic bacterial culture and in our anaerobic culture we found the Fusobacteria in the root canal.
- The cultivation of bacteria from deep pockets of a periodontitis patient with the reason to see what possible periodontal pathogens are present in the pockets. My patient had a relatively healthy oral flora. For this reason, we got a culture from the morning group to study. The gentleman I checked had 7*10^ 7/mL bacteria of which 90% concerned to be the Porphyromonas Gingivalis bacteria. So that is a seriously diseased oral flora.
- Cultivation of samples of sick patients with pathology in the mouth to see if it was indeed a fungal infection or a bacterial infection, in question. My patient had tuberculosis with a serious infection with the Pseudomonas bacteria (for fanciers it can be found on camembert cheese) and yeast.
- To test the sterilising ability of a vacuum autoclave compared to a non-vacuum autoclave. Here we tested sterilizing closed trays and petri dishes, in which we placed a spore-forming bacteria called Bacillus Stearothermophilius, to see if they were sterilised. After culturing the samples we had growth of the sample of autoclaving without a vacuum.
- The disinfection of the operation area of a root canal treatment with hydrogen peroxide 35%, followed by 5% iodine spirit after in which the iodine was inactivated by thiosulfate and a culture was made of the surfaces. It appeared that the areas covered by the Bacillus Subtilis showed no growth with this disinfection routine.
- The cultivating of bacteria’s in combination with seven different types of antibiotics to asses the resistance to and the effectiveness of the chosen antibiotic treatment. Our culture with the Fusobacterium Nucleatum revealed that it was only resistant to Erythromicine.
- Cultivating of your own plaque and saliva to asses the presence of different types of bacteria and fungi. Also samples of plaque from the marginal gingival and the posterior part of the tongue were obtained and stained with gram staining followed by examination under the microscope.
The cultures showed that in my plaque and saliva there are virtually no Streptococcus Mutans, Lactobacilli, Staphylococcus Aureus and Candida and the flora in my mouth resembles that of a healthy individual.
 |
| In het lab In the lab |
 |
| In het lab In the lab |
 |
| Een paar schalen met bacteriekweken. A few dishes with cultivated bacteria. |
 |
| De afdeling waar ons de speciale onderzoeksmethoden getoond worden. At the department where the special testing methods are shown to us. |
